021-39921927
产品简介
脑静脉血管平滑肌细胞的相关*：定量检测试剂盒 组织甲羟戊酸激（mevalonate kinase）活性比色法 20次定量检测试剂盒 血液甲羟戊酸激（mevalonate kinase）活性比色法 20次定量检测试剂盒 真/酵母甲羟戊酸激（mevalonate kinase）活性比色法 20次
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1059 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 脑静脉血管平滑肌细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1059 |
商品介绍：
名称 脑静脉血管平滑肌细胞 2.组织来源：脑静脉组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 人脑静脉血管平滑肌细胞分离自脑静脉组织；与脑动脉相比，脑静脉管壁较薄。与身体其他部位的静脉不同，脑静脉管壁中没有静脉瓣，静脉血的回流依赖高位的势能。脑静脉血的回流路径可以归纳为：大部脑静脉血经脑深部静脉和脑血窦流入颈内静脉；小部脑静脉血经眼部翼状静脉丛，进入静脉导血管再到头皮，最后流入椎管中的椎旁静脉系统。脑静脉系统有大量交通枝静脉丛，即使两侧颈内静脉都被阻塞，大脑静脉血仍可经椎静脉和颈外静脉系统完成其回流。脑静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。 5.方法简介： 实验室分离的人脑静脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的人脑静脉血管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H118 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传5代左右；3代以内状态最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
大鼠 CD4 基因全长ORF克隆
大鼠 CCL27 基因全长ORF克隆
大鼠 WFDC2 基因全长ORF克隆
大鼠 IL7RA / CD127 基因全长ORF克隆
大鼠 IL10 基因全长ORF克隆
大鼠 Thrombopoietin / THPO 基因全长ORF克隆
大鼠 IL23A 基因全长ORF克隆
大鼠 ERBB2 基因全长ORF克隆
大鼠 IL12A / P35 基因全长ORF克隆
大鼠 IL9R 基因全长ORF克隆
脑静脉血管平滑肌细胞78-5000 pg/mL 人淋巴细胞激活基因3（LAG-3）ELISA试剂盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Amine oxidase [flavin-containing] B
0.312-20 ng/mL. ELISA Kit for Cortisone
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Selenium-binding protein 1
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Retinoblastoma-like protein 1
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Angiotensin II
78-5000 pg/mL 人成纤维细胞生长因子5(FGF-5)ELISA试剂盒
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Frizzled-1
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Matrix metalloproteinase-19
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Actin, alpha skeletal muscle
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