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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1299 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
子宫内膜基质细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1299 |
商品介绍:
名称 子宫内膜基质细胞 2.组织来源:子宫组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 人子宫内膜基质细胞分离自子宫组织;子宫是孕育胎儿的器官,位于盆腔中部,膀胱与直肠之间,其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持,这些结构受损或松弛时,可以引起子宫脱垂。子宫内膜即黏膜,由上皮(属单层柱状上皮,有分泌细胞和纤毛细胞二种)和固有膜(由结缔组织构成,其内有大量的星形细胞,称为基质细胞)组成,子宫内膜可分为浅表的功能膜和深部的基底层,功能层较厚,约占内膜厚度的4/5;基底层较薄较致密,约占1/5,功能层可剥脱,而基底层不可剥脱。子宫内膜构成雌性哺乳动物子宫壁的最内层,位于子宫腔面,在动物生殖生理活动中占有重要地位。子宫和子宫内膜是维持雌性动物生理功能和生育能力的重要器官,子宫内膜的再生修复是子宫的重要生理功能。体外培养的子宫内膜基质细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。 5.方法简介: 实验室分离的人子宫内膜基质细胞采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的人子宫内膜基质细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H208 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传3-5代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
狗 IL2RB / IL2 Receptor beta 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
狗 IL3RA 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 KLK1 / Kallikrein 1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CD122 / IL2RB / IL2 Receptor beta 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 SPARCL1 / SPARC-like 1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 ANGPTL4 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 PROC1 / Protein C / PROC 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
GYPA / CD235a / Glycophorin A 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
RAB27B 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
子宫内膜基质细胞Saccharomyces cerevisiae抗心肌肌球蛋白抗体检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae可溶性补体受体检测试剂盒
Candida boidinii乙型肝炎病前S1抗原检测试剂盒
Candida boidinii清道夫受体B检测试剂盒
Candida boidinii鞘磷脂合成2检测试剂盒
Candida boidinii补体因子H相关蛋白3检测试剂盒
Candida boleticola跨膜蛋白98检测试剂盒
Debaryomyces hansenii var. hansenRas同源基因家族成员A检测试剂盒