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小鼠棕色前脂肪细胞

产品简介

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产品厂地:上海市
更新时间:2025-02-17
厂商性质:经销商
访问量:343
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品牌其他品牌货号GOY-01X1341
规格5×10⁵Cells/T25培养瓶供货周期现货
主要用途产品仅供科研使用应用领域化工

冷冻保存细胞之方法?

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。

冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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产品属性:   

产品名称

规格

货号

小鼠棕色前脂肪细胞

5×10⁵Cells/T25培养瓶

GOY-01X1341

商品介绍:

名称    小鼠棕色前脂肪细胞   

2.组织来源:脂肪组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

小鼠棕色前脂肪细胞分离自棕色脂肪组织;动物体内存在棕色和白色两种脂肪,白色脂肪堆积在皮下,负责储存多余热量;棕色脂肪负责分解引发肥胖的白色脂肪,将后者转化成二氧化碳、水和热量,本身不储存热量。棕色脂肪组织呈棕色,其特点是组织中有丰富的毛细血管,脂肪细胞内散着许多小脂滴,线粒体大而丰富,核圆形,位于细胞中央,这种脂肪细胞也称为多泡脂肪细胞。棕色脂肪组织在成年动物极少,新生儿及冬眠动物较多,在新生儿主要分布在肩胛间区、腋窝及颈后部等处。棕色脂肪组织仅在婴儿时期发挥作用,它们堆积在新生儿肩胛处,帮助维持体温。随着年龄增长,棕色脂肪会逐渐消失。最终,动物体内只残存少量棕色脂肪细胞,分布于颈部和锁骨。脂肪组织在体内含有两种主要的细胞:一种是在胞浆内积聚脂滴的成熟脂肪细胞;另一种是虽未在胞浆内积聚脂滴但有这种潜能的前脂肪细胞。前脂肪细胞呈梭形,有分裂和增殖的能力;成熟的脂肪细胞呈圆形,已经失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化前体细胞,与肥胖有着非常密切的关系。前脂肪细胞是一种类成纤维细胞,在演变的过程中不断吸收脂质,最终成为成熟的脂肪细胞。前脂肪细胞对外界机械损伤的抵抗力较强,可望成为软组织缺损的有益填充物。

5.方法简介:

实验室分离的小鼠棕色前脂肪细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的小鼠棕色前脂肪细胞经油红O染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

产品货号CM-M228

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态成纤维细胞样

传代特性可传2-3

消化液0.25%胰蛋白酶

培养条件气相:空气,95%CO25%

 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

小鼠 IL12B / IL-12B 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 CXADR / CAR 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 B3GALTL 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 LFA-3 / CD58 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 CD28 / TP44 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 EphB2 / Hek5 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 PDGFRB / PDGFR-1 / CD140b 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 IL1R2 / IL1RB / CD121b 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

食蟹猴 CD36 / SCARB3 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

食蟹猴 REG1B / PSPS2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠棕色前脂肪细胞人化腺苷酸活化蛋白激Anti-IL2 Receptor gamma/IL2RG Antibody松弛肽;松弛素检测试剂盒

人乳酸脱氢Anti-Leptin receptor(LEPR)(长亚型) Antibody酸性成纤维生长因子检测试剂盒

人解整合素样金属蛋白9Anti-GABA A Receptor gamma 2/GABRG2 Antibody酸性成纤维生长因子1检测试剂盒

β位淀粉样前体蛋白裂解2Anti-Endothelin A Receptor/ET-A/EDNRA Antibody髓过氧化物检测试剂盒

人尿嘧核苷化1Anti-Neurotensin receptor 2 Antibody 髓过氧化物特异性抗中性粒胞质检测试剂盒

人乙脱氢Anti-Olfactory receptor 5D3 Antibody髓鞘碱性蛋白检测试剂盒

Rho家族GTP1Anti-Phospho-GABAA Receptor beta3 (Ser408/409) Antibody髓鞘碱性蛋白抗体检测试剂盒

人受体TNFRSF结合激2Anti-Prostacyclin Receptor Antibody髓系触发受体-1检测试剂盒

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