大鼠颌骨成纤维细胞的相关*:猪内皮素1(ET-1)免疫试剂盒进口、分装猪末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫试剂盒现货供应猪缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(AMH)免疫试剂盒*直销猪免疫球蛋白M(IgM)免疫试剂盒进口、组装猪免疫球蛋白G(IgG)免疫试剂盒进口、分装
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1289 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
大鼠颌骨成纤维细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1289 |
商品介绍:
名称 大鼠颌骨成纤维细胞 2.组织来源:颌骨组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠颌骨成纤维细胞分离自颌骨组织;颌骨,是指颌部的骨头,分为上颌骨和下颌骨。构成口腔上下部的骨头和肌肉组织,上部叫上颌,下部叫下颌。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。 5.方法简介: 实验室分离的大鼠颌骨成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的大鼠颌骨成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R204 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传5代左右;3代以内状态最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 TLR3 / CD283 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
PTGS2 / COX2 / PGHS-2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
PRKD2 / PKD2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
TRIB2 / TRB2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 SerpinB12 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 VEGFA / VEGF164 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CDC37 / CDC37A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
EGFL7 / VE-statin 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
RBBP4 / RBAP48 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠颌骨成纤维细胞溶血磷脂酸酰基转移β抗体Human immunoglobulin kappa ELISA Kit大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒,
AFP4b蛋白抗体Human IGBP1 ELISA Kit大鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒,
载脂蛋白C2抗体Human IMP3(U3 small nucleolar ribonucleoprotein protein IMP3) ELISA Kit豚鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒,
载脂蛋白A5抗体Human IMPAD1 ELISA Kit猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA试剂盒,
载脂蛋白A2抗体Human IMP4 ELISA Kit鸭病性肠炎病(DEV)ELISA试剂盒,
溶血磷脂酸酰基转移D抗体Human IGF2BP2(insulin-like growth factor 2 mRNA binding protein 2) ELISA Kit绵羊白介素6(IL-6)ELISA试剂盒,
载脂蛋白E3抗体Human IGF2BP1(Insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 1) ELISA Kit植物乙酸(IAA) ELISA试剂盒,
ABI基因家族2抗体Human IMP5 ELISA Kit生长释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒--动物,人