大鼠尿道上皮细胞的相关*:组织切割/β分泌(MENAPSIN 2;β-SECRETASE)活性 20次荧光淬灭法定量检测试剂盒 细胞蛋白(PROTEASE)活性比色法定量检测试剂盒 20次组织蛋白(PROTEASE)活性比色法定量检测试剂盒 20次细蛋白(PROTEASE)活性比色法定量检测试剂盒 20次细胞逆转录(REVERSE TRANSCREPTASE)活性荧光定量
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0941 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
大鼠尿道上皮细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X0941 |
商品介绍:
名称 大鼠尿道上皮细胞 2.组织来源:尿道组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠尿道上皮细胞分离自尿道管组织;尿道是从膀胱通向体外的管道。尿道上皮细胞主要功能:①尿道上皮细胞排列在膀胱表面,它是由高可塑性和具有多种功能特殊类型的细胞组成;②上皮细胞组成膀胱的防御系统与病原体接触,它们具有多种防御机制来阻止病原体粘着,保持泌尿器溶解物的不渗透性;③膀胱上皮细胞表达雌激素α、β受体,上皮生长因子受体和纤维母细胞生长因子受体,在损伤和感染时,这些受体对膀胱上皮细胞起着重要作用;④能释放许多细胞因子、免疫系统介质。 5.方法简介: 实验室分离的大鼠尿道上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的大鼠尿道上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R070 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态上皮细胞样 传代特性可传1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
大鼠 RAC2 基因全长ORF克隆
大鼠 KRT14 基因全长ORF克隆
大鼠 SRI 基因全长ORF克隆
大鼠 SFR1 基因全长ORF克隆
大鼠 NAPA 基因全长ORF克隆
大鼠 GNPDA1 基因全长ORF克隆
大鼠 GTPBP5 基因全长ORF克隆
大鼠 PPT2 基因全长ORF克隆
大鼠 PLBD1 基因全长ORF克隆
大鼠 G6PC 基因全长ORF克隆
大鼠尿道上皮细胞0.312-20 ng/mL 脑膜炎奈瑟菌A群(NM-A)核酸检测试剂盒
大豆酪蛋白消化物琼脂培养基USP 英文名称:Tryptose Soya Broth 产品规格:250g
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Parvalbumin alpha
0.39-25 ng/mL 人解整合素样金属蛋白9(ADAM9)ELISA试剂盒
抗生素检测培养基II 英文名称:Antibiotic Agar No.2 产品规格:250g
15.6-1000 pg/mL 前列腺素E2(Prostaglandin E2)ELISA试剂盒
0.156-10 ng/mL 猪链球菌通用型(SS-U)核酸检测试剂盒
0.156-10 ng/mL 人五聚素3(PTX3)ELISA试剂盒
培养基(蛋白胨水) 英文名称:Indole Medium 产品规格:10g
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Radical S-adenosyl methionine domain-containing protein 2