021-39921927
产品简介
大鼠胚胎干细胞的相关*：小鼠解整合素样金属蛋白9(ADAM9)免疫试剂盒现货供应小鼠解整合素样金属蛋白8(ADAM8)免疫试剂盒*直销小鼠解脲脲原体抗体(UU-Ab)免疫试剂盒进口、组装小鼠睫状神经营养因子(CNTF)免疫试剂盒进口、分装小鼠结缔组织生长因子(CTGF)免疫试剂盒现货供应
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1421 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠胚胎干细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1421 |
商品介绍：
名称 大鼠胚胎干细胞 2.组织来源：囊胚 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 大鼠胚胎干细胞分离自囊胚胚胎组织；胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESCs，简称ES、EK或ESC细胞）是早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。进一步说，胚胎干细胞（ES细胞）是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞。ES细胞具有与早期胚胎细胞相似的形态结构，细胞核大，有一个或几个核仁，胞核中多为常染色质，胞质胞浆少，结构简单。体外培养时，细胞排列紧密，呈集落状生长。用碱性磷酸酶染色，ES细胞呈棕红色，而周围的成纤维细胞呈淡黄色。细胞克隆和周围存在明显界限，形成的克隆细胞彼此界限不清，细胞表面有折光较强的脂状小滴。细胞克隆形态多样，多数呈岛状或巢状。小鼠ES细胞的直径7 微米～18 微米，猪、牛、羊ES细胞的颜色较深，直径12 微米～18 微米。胚胎干细胞与普通细胞有显著差别，有其特定的生长特性和特定的标志，例如碱性磷酸酶活性非常高，带有胚胎阶段特异性表面抗原（ Stage- specific embryonic antigens,SSEA），人类胚胎干细胞还带有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等标志，这些特性和标志均可以用于对胚胎干细胞进行鉴定，除此之外，胚胎干细胞还可以在体外传代，并保持正常核型。在体外培养体系中加入分化抑制剂如白血病抑制因子（ Leukaemia inhibitory factor,LF）或者在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层（MEF）上培养时，胚胎干细胞都能呈克隆性增殖，长期保持核型正常和稳定，冻存解冻也不影响不分化的特性。另外，胚胎干细胞还表现岀高水平端粒酶活性，目前证明端粒酶与细胞衰老密切相关，多数成熟细胞的端粒酶活性都很低。这些都是胚胎干细胞与成熟细胞不同的重要特点，也可能是其复制生命期限远比体细胞长的原因。 5.方法简介： 实验室分离的大鼠胚胎干细胞采用分离囊胚组织，去除胚胎透明带、使用特制专用培养基筛选培养，胰酶消化传代纯化制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的大鼠胚胎干细胞经Oct-4免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 包被条件明胶（0.1%） 培养基含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R320 换液频率每2-3天换液一次； 生长特性贴壁 细胞形态短梭形、多角形 传代特性可传5-8代左右 消化液0.025%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
XPNPEP2 / X-Pro aminopeptidase 2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
IGFBP6 / IBP-6 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 IGFBP6 / IBP-6 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
PRSS27 / Pancreasin / Marapsin 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CD4 / LEU3 (aa 1-208) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
RSPO3 / R-spondin 3 (aa 1-146) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
FGFR4 / FGF Receptor 4 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
IL12A & IL12B Heterodimer 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
FLT1 / VEGFR1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 SerpinA6 / CBG 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠胚胎干细胞ATPIF1蛋白抗体Human LEFTY2 ELISA Kit小鼠脑红蛋白（NGB）ELISA试剂盒,
Attractin蛋白抗体Human LEF1 ELISA Kit小鼠α2抗纤溶（α2-AP）ELISA试剂盒,
化有丝分裂激B抗体Human LCTL ELISA Kit白活化黏附因子（ALCAM）ELISA试剂盒--动物，人
肌动蛋白相关蛋白M1抗体Human LDB1 ELISA KitⅠ型胶原N末端肽（NTX）ELISA试剂盒--动物，人
ALKB蛋白抗体Human LDB3 ELISA Kit包虫抗体IgG ELISA试剂盒--动物，人
乙酰辅A酰基转移1抗体Human LDHAL6A ELISA Kit降钙素原（PCT）ELISA试剂盒--动物，人
化β-肌动蛋白抗体Human LAX1 ELISA Kit促甲状腺素释放（TRH）ELISA试剂盒--动物，人
化素能受体β2/β2-AR 抗体Human LATS2 ELISA Kit兔血栓素B2（TXB2）ELISA试剂盒,
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