021-39921927
产品简介
小鼠角膜内皮细胞的相关*：细赖铁琼脂平板 50个细醋酸铅琼脂平板 50个葡萄球110肉汤 500毫升肠杆EE营养肉汤 500毫升细脱氧胆酸盐琼脂平板 50个低盐LB细培养液 500毫升
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1223 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 小鼠角膜内皮细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1223 |
商品介绍：
名称 小鼠角膜内皮细胞 2.组织来源：眼角膜组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 小鼠角膜内皮细胞分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。角膜的高度透明性和光学性是正常发挥生理功能的必要条件之一，而角膜内皮细胞（CEC）在维持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜内皮细胞是角膜内层的单层细胞，构成了后弹力层和房水之间的物理屏障，通过离子“泵"功能调节角膜中离子浓度和水分，维持角膜的半脱水状态，保证角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜内皮细胞功能出现紊乱，常导致角膜水肿而使角膜部分甚至*失去透明性。角膜内皮细胞主要功能有：①角膜是的无血管的组织，具有透明的特性和合成许多蛋白的功能；②角膜内皮细胞对角膜透明性有重要作用；③角膜内皮细胞通过Na+-K+-ATP酶活性，维持角膜和房水内Na+梯度，防止水分渗入角膜内，维持角膜实质层相对脱水状态，维持透明性。 5.方法简介： 实验室分离的小鼠角膜内皮细胞采用混合胶原酶消化结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的小鼠角膜内皮细胞经NSE（神经元特异性烯醇化酶）免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 包被条件PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%） 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M179 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态内皮细胞样 传代特性可传2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
KLK13 / Kallikrein 13 ELISA配对抗体
PIGR ELISA配对抗体
PDGFRA / CD140a ELISA配对抗体
IL3RA / CD123 ELISA配对抗体
CTLA4 / CD152 ELISA配对抗体
MSR1 / CD204 ELISA配对抗体
小鼠 CD14 ELISA配对抗体
甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配对抗体
SerpinG1 / C1 inhibitor / C1IN ELISA配对抗体
METTL1 ELISA配对抗体
小鼠角膜内皮细胞大脑蛋白2抗体Human GPX8 ELISA Kit小鼠抗利尿/血管/精（ADH/VP/AVP）ELISA试剂盒,
程序性死亡配体1抗体Human GRAMD1B ELISA Kit小鼠吡交联物（PY）ELISA试剂盒,
B7-H4抗体Human GRAMD4 ELISA Kit大鼠己糖激（HK）ELISA试剂盒,
β分泌抗体Human GRB7 ELISA Kit大鼠血小板反应蛋白/敏感蛋白1（TSP-1）ELISA试剂盒,
相关死亡促进因子Bad抗体Human GRHPR(Glyoxylate Reductase/Hydroxypyruvate Reductase) ELISA Kit猪黑色素瘤转移表面黏附分子（MMSAM）ELISA试剂盒,
BaxHuman GRID1 ELISA Kit鸡一氧化氮（NO）ELISA试剂盒,
程序性死亡配体2抗体Human GPS2 ELISA Kit猴白介素4（IL-4）ELISA试剂盒,
胆汁酸盐输出泵/ATP结合盒转运蛋白11抗体Human GPSM2 ELISA Kit猴载脂蛋白A1（apo-A1）ELISA试剂盒,
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