021-39921927
产品简介
DT40 (鸡淋巴瘤细胞)的相关*：两步法RT－PCR试剂盒 20/50次一步法RT－PCR试剂盒 20/50次直接细胞克隆两步法逆转录PCR试剂盒 100次两步法RT－PCR荧光定量试剂盒 20/50次逆转录RT试剂盒 20/50次体外RNA转录合成试剂盒 10次
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0543 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| DT40 (鸡淋巴瘤细胞) | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | GOY-01X0543 |
商品介绍：
名称 DT40 (鸡淋巴瘤细胞) 别称DT-40; DT 40; DT40B; LSCC-DT40 年龄（性别）1日龄 组织来源法氏囊，淋巴瘤 生长特性悬浮细胞 细胞形态淋巴母细胞样 背景描述DT40细胞是Hyline SC鸡法氏囊淋巴细胞株经鸟类白血病病毒诱导建株的细胞系。原始淋巴瘤用罗氏相关病毒1(RAV-1)感染出生1天的小鸡得到，法氏囊中生成的肿瘤制成细胞悬液后通过静脉注射输入同基因型的受体小鸡。经过一次体内移植后，建立了DT40细胞。DT40细胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，表达的c-myc RNA水平较高。DT40细胞缺少一个正常c-myc基因，但含有两个拷贝ALV去调控的myc基因。DT40细胞保留了重排免疫球蛋白轻链基因(IgL)的能力。在IgL位点，DT40包含一个重排和一个胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40细胞中都能诱导组织相容性(MHC)Ⅱ类抗原表达。v-rel诱导的MHCⅡ表达比c-rel诱导快，且其有效性在数周后达到c-rel的50倍。DT40细胞呈淋巴母细胞表型；传染性检测表明，DT40细胞释放低水平的传染性RAV-1，DT40细胞株可以用于稳转研究。 生物安全等级1 生长培养基DMEM＋0.05mM β-mercaptoethanol＋10% Tryptose Phosphate Broth＋5% Chicken Serum＋10% FBS＋1% P/S 推荐传代比例1:3-1:4 推荐换液频率2~3次/周 倍增时间~48 hours 冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃ |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
B3GNT6 基因全长ORF克隆
AQPEP 基因全长ORF克隆
CLOCK 基因全长ORF克隆
FBXO11 基因全长ORF克隆
PLBD2 基因全长ORF克隆
MATN4 基因全长ORF克隆
ZIC3 基因全长ORF克隆
GLP1R 基因全长ORF克隆
IRF8 基因全长ORF克隆
CCNI2 基因全长ORF克隆
DT40 (鸡淋巴瘤细胞)2 ug pRFP-GFP-LC3 pRFP-GFP-LC3 低温运输，-20℃保存
变形杆菌成套生化鉴定管（SN） 13种/盒*10
2 ug pPinPoint-Xa1 pPinPoint-Xa1 低温运输，-20℃保存
皮肤癣菌鉴别琼脂（DTM） DTM Agar 250g
100g 麦芽糖 D-(+)-Maltose Monohydrate 室温保存
50T 脑膜炎奈瑟菌ACR检测试剂盒 低温运输，-20℃保存
10 mg 5（6）-TRITC Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
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