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大鼠骨髓单个核细胞

产品简介

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产品厂地:上海市
更新时间:2025-02-16
厂商性质:经销商
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品牌其他品牌货号GOY-01X1423
规格5×10⁵Cells/T25培养瓶供货周期现货
主要用途产品仅供科研使用应用领域化工

冷冻保存细胞之方法?

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。

冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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产品属性:   

产品名称

规格

货号

大鼠骨髓单个核细胞

5×10⁵Cells/T25培养瓶

GOY-01X1423

商品介绍:

名称    大鼠骨髓单个核细胞   

2.组织来源:骨髓

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

大鼠骨髓单个核细胞分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓单个核细胞是骨髓中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。注意这里是(mononuclear cell)单个核细胞,而不是(Monocyte)单核细胞。单个核细胞的体积、形态和比重与骨髓其他细胞不同,利用一定比例聚蔗糖和泛影酸钠形成的等渗溶液作密度梯度离心,使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,可将各种血细胞与单个核细胞分离。

5.方法简介:

实验室分离的大鼠骨髓单个核细胞采用取骨髓、通过密度梯度离心法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的大鼠骨髓单个核细胞经过检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

产品货号CM-R322

换液频率每2-3天换液一次

生长特性半贴壁半悬浮

细胞形态圆形

传代特性不增殖;不传代

消化液0.25%胰蛋白酶

培养条件气相:空气,95%CO25%

 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

小鼠 KIRREL3 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 IL-24 / Interleukin-24 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 OMG / OMGP (aa 1-420) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 OMG / OMGP (aa 1-416) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 FCGRT & B2M Heterodimer 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

食蟹猴 CD32a / FCGR2A 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

大鼠 E-selectin / ELAM-1 / CD62E 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

大鼠 FCAR / CD89 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 CST1 / Cystatin-1 / Cystatin-SN 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

大鼠骨髓单个核细胞Halomonas sp.二氢辣椒素检测试剂盒

Marinobacter sp.辣椒素检测试剂盒

Corynebacterium ammoniagenes抗氧化检测试剂盒

Microbacterium sp.法尼基焦合检测试剂盒

Halorubrum sp.角鲨烯单加氧;鲨烯环氧检测试剂盒

Halorubrum californiensisβ-香树脂合成检测试剂盒

Halorubrum sp.鲨烯合检测试剂盒

Halorubrum sp.抗性淀粉检测试剂盒

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