021-39921927
产品简介
小鼠肾小球上皮细胞的相关*：猪肝细胞生长因子(HGF)免疫试剂盒*直销猪甘油醛-3-脱氢(GAPDH)免疫试剂盒进口、组装猪钙/钙调素依赖性蛋白激2δ(CAMK2D)免疫试剂盒进口、分装猪钙/钙调素依赖性蛋白激2γ(CAMK2G/CAMKG)免疫试剂盒现货供应猪钙/钙调素依赖性蛋白激2β(CAMK2B/CAM2/CAMKB)免疫试剂盒*直销
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1303 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 小鼠肾小球上皮细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1303 |
商品介绍：
名称 小鼠肾小球上皮细胞 2.组织来源：肾组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 小鼠肾小球上皮细胞分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活性维D3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛，被鲍氏囊所包裹，是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球上皮细胞是由间充质细胞分化发育、衬贴于肾小球血管腔的单层扁平上皮细胞，是肾小球的固有细胞之一，也是构成肾小球滤过膜的重要组成部分。肾小球上皮细胞的正常结构和功能是肾单位滤过及肾小球微环境稳定的重要保障。肾小球滤过膜的最外层为上皮细胞层，厚约40nm，肾小球上皮细胞是肾小囊的脏层上皮细胞，贴附于肾小球血管外侧基底膜上。上皮细胞又称足细胞，足细胞的不规则突起为足突，其间有许多狭小间隙，血液经滤过膜过滤入肾小球囊。肾小球上皮细胞可通过合成和分泌肾上腺髓质肽抑制系膜细胞增殖，肾上腺髓质肽作为一种重要的旁分泌因子，可保持肾小球微环境稳定，并参与肾小球的炎症过程。体外培养的肾小球上皮细胞对各型肾小球肾炎具有重要的研究价值。 5.方法简介： 实验室分离的小鼠肾小球上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的小鼠肾小球上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 包被条件鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M209 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态上皮细胞样 传代特性可传1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
HCST / DAP10 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
LRP11 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
FAM171B / KIAA1946 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
Statherin / STATH 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
TMUB2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
SUSD4 / Sushi domain-containing 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
SCG2 / Secretogranin II 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
BTN3A3 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
LRG1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠肾小球上皮细胞Candida tropicalis白介素5检测试剂盒
Pseudozyma hubeiensis白介素7检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae白介素8检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae白介素9检测试剂盒
Torulaspora delbrueckii白抗原G检测试剂盒
Metschnikowia zizyphicola白血病抑制因子检测试剂盒
Candida sp.半胱蛋白1检测试剂盒x
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