小鼠心脏纤维原细胞的相关*:猪胰高血糖素样肽2(GLP2)免疫试剂盒*直销猪胰高血糖素样肽1(GLP1)免疫试剂盒进口、组装猪胰高血糖素(GC)免疫试剂盒进口、分装猪胰淀粉α2(PAMY α2)免疫试剂盒现货供应猪胰岛素原(PI)免疫试剂盒*直销
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1267 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
小鼠心脏纤维原细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1267 |
商品介绍:
名称 小鼠心脏纤维原细胞 2.组织来源:心脏组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠心脏纤维原细胞分离自心脏组织;心脏由心肌细胞和非心肌细胞组成,非心肌细胞占细胞总数的70%,其中90%以上的非心肌细胞由心肌成纤维细胞组成。纤维细胞是机能不活跃的成纤维细胞。胞体呈梭形,胞质较少,弱嗜酸性,胞核小,染色深。电镜下可见,细胞中粗面内质网和高尔基体均不发达。当组织受损时,纤维细胞可转化为成纤维细胞而参与修复过程。纤维细胞和成纤维细胞是处于不同功能状态的同一种细胞,如在组织损伤后的修复过程中,纤维细胞可转化为功能活跃的成纤维细胞。纤维细胞较小,呈多角形,胞质较少,弱嗜酸性,胞核亦较小,染色较深,电镜下粗面内质网较少,高尔基复合体不发达。成纤维细胞较大,呈星形或梭形,有突起,细胞核呈卵圆形,染色质稀疏,染色淡,核仁明显,胞质较多。成纤维细胞能合成和分泌胶原蛋白、弹性蛋白和蛋白多糖,形成胶原纤维、弹性纤维和网状纤维以及基质成分。心肌成纤维细胞主要功能为对心肌细胞起结构支持作用并负责细胞基质外的合成,当心肌损伤时能产生旁分泌生长因子。心肌成纤维细胞是心脏结缔组织中最常见的细胞,可合成和分泌胶原纤维、弹性纤维、网状纤维及有机基质,并且在外伤等因素刺激下,部分纤维细胞可重新转变为幼稚的成纤维细胞,其功能活动也得以恢复,参与组织损伤后的修复。因此,对心肌成纤维细胞的生理学研究成为现代心血管领域研究的一个重点。 5.方法简介: 实验室分离的小鼠心脏纤维原细胞采用胶原酶消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠心脏纤维原细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M196 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
FGFBP3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
MFG-E8 / lactadherin / MFGE8 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
Hemojuvelin / HFE2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CAMK4 / CaMKIV 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
FGFR2 / CD332 (aa 400-821) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
PDGF-C / SCDGF 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
HER3 / ErbB3 (aa 730-1065) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠心脏纤维原细胞乙型肝炎二对半全套(立可读)Anti-LIPI Antibody小鼠脑红蛋白(NGB)elisa定量检测试剂盒
乙型肝炎表面抗原Anti-LMTK3 Antibody小鼠肌肉糖原化(PYGM)elisa定量检测试剂盒
乙型肝炎表面抗体Anti-LONP2 Antibody小鼠胰岛素自身抗体(IAA)elisa定量检测试剂盒
乙型肝炎e抗原Anti-LPAR3 Antibody小鼠N-乙酰半乳糖-6-酯(GAS)elisa定量检测试剂盒
乙型肝炎e抗体Anti-LOX Antibody小鼠肝素辅助因子II(HC II)elisa定量检测试剂盒
乙型肝炎核心抗体Anti-LMX1B Antibody小鼠抑制素B(INHB)elisa定量检测试剂盒
乙型肝炎表面抗原Anti-LPAR3 Antibody小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)elisa定量检测试剂盒
乙型肝炎表面抗体Anti-LPAR5 Antibody小鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa定量检测试剂盒