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大鼠棕色脂肪干细胞

产品简介

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产品厂地:上海市
更新时间:2025-02-16
厂商性质:经销商
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品牌其他品牌货号GOY-01X1345
规格5×10⁵Cells/T25培养瓶供货周期现货
主要用途产品仅供科研使用应用领域化工

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

产品属性:  

产品名称

规格

货号

大鼠棕色脂肪干细胞

5×10⁵Cells/T25培养瓶

GOY-01X1345

商品介绍:

名称    大鼠棕色脂肪干细胞  

2.组织来源:脂肪组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

大鼠棕色脂肪干细胞分离自棕色脂肪组织;动物体内存在棕色和白色两种脂肪,白色脂肪堆积在皮下,负责储存多余热量;棕色脂肪负责分解引发肥胖的白色脂肪,将后者转化成二氧化碳、水和热量,本身不储存热量。棕色脂肪组织呈棕色,其特点是组织中有丰富的毛细血管,脂肪细胞内散着许多小脂滴,线粒体大而丰富,核圆形,位于细胞中央,这种脂肪细胞也称为多泡脂肪细胞。棕色脂肪组织在成年动物极少,新生儿及冬眠动物较多,在新生儿主要分布在肩胛间区、腋窝及颈后部等处。棕色脂肪组织仅在婴儿时期发挥作用,它们堆积在新生儿肩胛处,帮助维持体温。随着年龄增长,棕色脂肪会逐渐消失。最终,动物体内只残存少量棕色脂肪细胞,分布于颈部和锁骨。脂肪干细胞(ADSCs)是一种具有多向分化潜能的干细胞,主要恢复组织细胞的修复功能,促进细胞的再生,恢复年轻面容的同时,身体机能也得到充分改善,有效改善亚健康、早衰等疾病,由内而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干细胞具有很多优点:具有自我更新及多向分化的潜能;来源充足;对供区的创伤较小;获得率及体外扩增速率高。脂肪干细胞是目前被广泛应用于组织工程领域中理想的种子细胞。

5.方法简介:

实验室分离的大鼠棕色脂肪干细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的大鼠棕色脂肪干细胞CD90免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

产品货号CM-R229

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态成纤维细胞样

传代特性可传5代左右;3代以内状态最佳

消化液0.25%胰蛋白酶

培养条件气相:空气,95%CO25%

冷冻保存细胞之方法?

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。

冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

小鼠 CD45 / PTPRC 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 AGRP 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 GITR / TNFRSF18 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 GPNMB / Osteoactivin 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 Discoidin / DCBLD1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 OPALIN 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 AMIGO2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 ART3 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 FKBP14 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

食蟹猴 CD200 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

大鼠棕色脂肪干细胞Rhizobium indigoferae球蛋白检测试剂盒

Rhizobium leguminosarum血氨检测试剂盒

Rhizobium leguminosarum白抗原DR检测试剂盒

Rhizobium leguminosarum蛋白抑制因子3检测试剂盒

Rhizobium leguminosarum犬尿检测试剂盒

Rhizobium leguminosarumACTG1检测试剂盒

Rhizobium leguminosarum球蛋白G4抗体检测试剂盒

Rhizobium leguminosarum半胱检测试剂盒

 

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