021-39921927
产品简介
胃癌组织成纤维细胞的相关*：猪可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)免疫试剂盒进口、分装猪可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)免疫试剂盒现货供应猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)免疫试剂盒*直销猪可溶性P选择素(sP-Selectin)免疫试剂盒进口、组装猪抗中性粒细胞弹性蛋白抗体(ANEA)免疫试剂盒进口、分装
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1293 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 胃癌组织成纤维细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1293 |
商品介绍：
名称 胃癌组织成纤维细胞 2.组织来源：胃癌组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 人胃癌组织源成纤维细胞分离自患有胃癌病人的胃癌组织；胃癌（gastric carcinoma）是起源于胃黏膜上皮的恶性肿瘤，在我国各种恶性肿瘤中发病率居，胃癌可发生于胃的任何部位，其中半数以上发生于胃窦部，胃大弯、胃小弯及前后壁均可受累，绝大多数胃癌属于腺癌。在胃癌侵袭和转移的过程中，涉及诸多复杂的过程，如细胞外基质的硬化和降解、新生血管的形成等，而这些过程会直接或间接的引起肿瘤微环境（Tumor mircoenvironment）的改变。肿瘤微环境即肿瘤细胞生存的外部环境，由不同种类的非肿瘤性的细胞与细胞外基质（Extracellular matrix，ECM）构成，包括纤维细胞，免疫细胞，内皮细胞，间充质干细胞等，肿瘤细胞通过调控这些间质细胞，创造出有利于自身侵袭转移的条件，从而使得肿瘤得到进展。越来越多的证据表明，肿瘤微环境的改变在肿瘤进展中扮演着重要的角色。在肿瘤微环境中，研究最多也是最主要的间质细胞是肿瘤相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblasts, CAFs）。CAFs 主要由肿瘤周边的正常成纤维细胞和成纤维细胞样细胞演化而来。胃癌组织源成纤维细胞多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。刚分离的胃癌组织源成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁*，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。 5.方法简介： 实验室分离的人胃癌组织成纤维细胞采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的人胃癌组织成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H206 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传5代左右；3代以内状态最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Lck Kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CCNA1 / Cyclin-A1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
甲型流感 H1N1 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
S100A9 / CAGB / p14 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
S100A8 / CAGA / p8 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
TGM2 / Transglutaminase 2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CNTFR / CNTFR-alpha 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
ACBD6 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
MAP1D / Methionine Aminopeptidase 1D 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
S100A6 / CACY 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
胃癌组织成纤维细胞CD318抗体Human SAT1(Diamine acetyltransferase 1) ELISA Kit三糖铁琼脂（TSI）
着丝粒蛋白B抗体Human SH3BP2(SH3 Domain Binding Protein 2) ELISA Kit产芽孢肉汤 用于产气荚膜梭的产芽孢培养
1号染色体开放阅读框111抗体Human IFNA2(Inteferon alpha 2a) ELISA Kit疱肉牛肉粒 加入疱肉基础中，配成疱肉培养基
19号染色体开放阅读框80抗体Human NENF(Neudesin) ELISA KitCBZ-L-焦谷
半胱双加氧1抗体Human SCUBE2(Signal peptide, CUB and EGF-like domain-containing protein 2) ELISA KitBOC-L-天冬酰
胶原蛋白11A2抗体Human beta 1-ARA(beta 1 adrenergic receptor autoantibody) ELISA Kit芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-
CUL4B蛋白抗体Human Wnt6(Protein Wnt-6) ELISA Kit大豆苷 Daidzin
1号染色体开放阅读框103抗体Human NEXN(Nexilin) ELISA Kit钩吻素子 Koumine
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