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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1389 |
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规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产品仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
小鼠肝非实质细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1389 |
商品介绍:
名称 小鼠肝非实质细胞 2.组织来源:肝组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠肝非实质细胞分离自肝脏组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。肝实质细胞具有肝功能的单位,是肝脏的基本组成单位之一。肝非实质细胞是指除了肝实质细胞之外的细胞,主要包含了肝窦内皮细胞、肝星状细胞、肝枯否细胞。 5.方法简介: 实验室分离的小鼠肝非实质细胞采用取肝脏灌流、胶原酶消化、密度梯度离心法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠肝非实质细胞经过检测,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M304 换液频率每2-3天换液一次 生长特性悬浮 细胞形态圆形 传代特性不增殖;不传代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 MANF / ARMET 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 SPINK4 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 VNN1 / Vanin-1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 IL1R1 / CD121a 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 Lactotransferrin / LTF 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
SCN3B 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
NRG1-alpha (ECD) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠肝非实质细胞糖原 ≥90% 苯甲 AR,>98.5%(GC)Anti-Phospho-LKB1 (Thr189) /FITC 荧光素标记化/蛋白激抗体IgG
甘油 for molecular biology, ≥99%2-叔丁基 99%Anti-LN /FITC 荧光素标记层粘连蛋白抗体IgG
甘油 无菌,for molecular biology, ≥99%2,4-二叔丁基酚 97%Anti-Integrin alpha 4,beta 7(LPAM-1)/FITC 荧光素标记整合素α4β7抗体IgG
纤维素 80~125mpa.s,25℃ 2,6-二叔丁基酚 98%Anti-HRH3/GPCR97/FITC 荧光素标记组织H3受体抗体IgG
顺式-4-羟基-L-脯 98%2,4,6-三叔丁基酚 99%Anti-HRH4/GPCR105/FITC 荧光素标记组织H4受体抗体IgG
羟赖 97% AR,99.0%Anti-LOX-1/OLR1/FITC 荧光素标记凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体抗体IgG
潮霉素B溶液 50mg/ml溶液 ACSAnti-Lpin1 protein/FITC 荧光素标记Lpin1 抗体IgG
潮霉素B 超纯级 99.99% metals basisAnti-Lpin1 protein/FITC 荧光素标记Lpin1 抗体IgG