在环境监测、食品安全、临床检验与科研分析中,比色法检测试剂盒凭借其操作简便、成本低廉、无需大型仪器的优势,成为快速定量或半定量检测物质的产品。它通过化学反应将待测物浓度转化为可观察的颜色深浅,再通过目视比色卡或分光光度计读取结果。掌握
比色法检测试剂盒科学、规范的使用方法,是确保其精准、可靠的关键。

一、使用前准备
试剂检查与复温:
检查试剂盒是否在有效期内,包装是否完好;
若试剂需冷藏保存(2-8℃),使用前室温(15-30℃)平衡30分钟,避免冷凝水影响反应。
样本处理:
根据检测项目对样本(水样、血液、食品提取液等)进行必要前处理:
过滤去除悬浮物;
稀释至检测范围内;
调节pH值至反应所需范围。
仪器与耗材准备:
准备洁净比色管、移液器、计时器;
若使用分光光度计,预热并校准波长。
二、加样与反应
精确加样:
使用校准的移液器,按说明书顺序加入样本与试剂;
先加样本,后加试剂,避免交叉污染;
严格控制加样量(如1.0mL样本+0.5mL试剂)。
混合均匀:
加样后立即盖紧管盖,充分摇匀或涡旋,确保反应全;
避免剧烈震荡导致泡沫,影响比色。
控时控温反应:
将反应管置于恒温水浴或室温避光处,严格按说明书控制反应时间(如10分钟)与温度(如25℃);
使用计时器,避免时间偏差。
三、比色读数
目视比色法:
将反应液倒入比色皿或直接观察比色管;
在自然光或标准光源下,与比色卡平行对比,选择接近的颜色等级;
读数时视线与液面持平,避免折射误差。
仪器比色法:
将反应液转移至石英或玻璃比色皿;
用空白试剂调零,选择指定波长(如520nm)测定吸光度(OD值);
根据标准曲线或公式计算浓度。
四、标准曲线绘制(定量检测)
配制标准系列:
使用标准品配制不同浓度梯度(如0、0.1、0.5、1.0、2.0mg/L);
同步反应:
标准品与样本在相同条件下进行显色反应;
绘制曲线:
以浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制标准曲线,确保R?≥0.99。
五、结果计算与报告
半定量:直接读取比色卡对应浓度范围;
定量:根据样本OD值在标准曲线上查找对应浓度,乘以稀释倍数;
记录:详细记录样本编号、检测时间、操作人员、环境温湿度及结果。