荧光定量试剂盒通过荧光信号的变化来定量目标分子的数量,为科研人员和医疗工作者提供了强大的技术支持。本文将深入探讨
荧光定量试剂盒的工作原理及应用场景,带您了解这一技术。

一、工作原理
1、荧光标记
荧光定量试剂盒通常采用荧光染料或荧光标记探针来标记目标分子(如DNA、RNA或蛋白质)。这些荧光标记物能够在固定波长的激发光照射下发出荧光信号。常见的荧光染料包括SYBR Green、EvaGreen等,它们能够特异性地结合到双链DNA上,并在受到激发时发出明亮的荧光信号。而荧光探针则基于TaqMan探针或分子信标等技术,具有更高的特异性和灵敏度。
2、实时监测
在PCR扩增过程中,荧光信号随着目标分子数量的增加而增强。荧光定量PCR仪器通过实时监测每个循环中的荧光强度变化,生成扩增曲线。根据标准曲线或Ct值(阈值循环数),可以精确计算出样本中目标分子的初始浓度,从而实现定量分析。
二、应用场景
1、基因表达分析
荧光定量试剂盒广泛应用于基因表达水平的研究。通过对特定基因mRNA的定量分析,可以了解其在不同组织、细胞类型或生理状态下的表达差异,揭示基因功能及其调控机制。
2、病原体检测
在传染病诊断中,荧光定量PCR技术能够快速、准确地检测各种病原体(如病毒、细菌、真菌等)。例如,新冠疫情期间,它被大量用于新冠病毒核酸检测,为疫情防控提供了有力支持。