ZR-75-1人乳腺癌细胞培养步骤

ZR-75-1人乳腺癌细胞培养步骤：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。

2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3、冻存液：90%wan全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。 

二、细胞处理：

1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 

2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 

收到后处理

培养至良好状态后灌满wan全培养液并封好瓶口是运输细胞的 办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存( 40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。(传代后建议一瓶用原瓶的wan全培养基,另外一瓶用自己配的wan全培养基,以便进行对比培养,换液拧松瓶盖),该细胞的STR鉴定可向客服咨询索取。