秋行军虫卵巢细胞Sf9克隆株细胞培养操作规程

秋行军虫卵巢细胞Sf9克隆株细胞培养操作规程：

一．养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 标签)

重组人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 标签)

重组小鼠 CCL17 / TARC 蛋白

重组人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 标签)

重组人 CCL21 / 6Ckine 蛋白

重组人 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

重组小鼠 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

重组食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (Fc 标签)

重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 标签)

重组食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 (His 标签)

重组小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 标签)

重组小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 标签)

重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 标签)

重组小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 标签)

重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 标签)

重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 标签)

重组人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 标签)

重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 标签)

重组小鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 标签)

重组人 CCL5 / RANTES 蛋白 (His & mucin 标签)

重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77)