人白细胞共同抗原(LCA/CD45)免疫组化试剂盒​操作步骤

人白细胞共同抗原(LCA/CD45)免疫组化试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。

phospho-AKT1(Thr34)磷酸化蛋白激酶B抗体

phospho-ATF2(Ser472)磷酸化活化复制因子2抗体

3-Apr凋亡相关蛋白3抗体

ATG18自噬相关蛋白18抗体

ATG4A自噬相关蛋白4A抗体

APOA4载脂蛋白A4抗体

ALOX1212脂氧合酶抗体

Angiotensin III血管紧张素III抗体

ADCY3腺苷酸环化酶3抗体

Angiomotin血管动蛋白抗体

Adenovirus 5 E1A腺病毒早期E1A蛋白抗体

phospho-ATF2 (Ser44)磷酸化活化复制因子2抗体

phospho-ATF2 (Ser94)磷酸化活化复制因子2抗体

phospho-ATXN1(Thr236)磷酸化失调症蛋白1抗体

ANKRD17锚蛋白重复结构域蛋白17抗体

ALDH1A1胞质乙醛脱氢酶1抗体

ARL3ADP核糖基化样因子ARL3抗体

15 Lipoxygenase 1花生四烯酸15脂氧合酶1抗体

ABC2乳腺癌增强蛋白2抗体

Alpha 1 microglobulinα1微球蛋白抗体

Alpha B Crystallinα晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体

ADORA2B腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体

ARK5AMPK的相关蛋白激酶5抗体

ANP32C致瘤磷蛋白32相关蛋白1抗体

Adenosine deaminase腺苷脱氨酶抗体

ASB4含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族4抗体

ATRNL1ATRNL1蛋白抗体

AFP4aAFP4a蛋白抗体

APBB2铁蛋白Fe65样蛋白1抗体

APBB3铁蛋白Fe65样蛋白2抗体

APPBP2β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白2抗体

Aph-1b早老素稳定因子样蛋白/γ分泌酶组件蛋白APH1抗体

phospho-AKT1 (Tyr474)磷酸化蛋白激酶AKT1抗体