小鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸elisa检测试剂盒​操作步骤

小鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸elisa检测试剂盒操作步骤：

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。

小鼠CXCR4(mouse CXCR-4)

小鼠皮质酮(mouse Corticosterone)

小鼠环氧化酶-2 (mouse COX-2)

小鼠结缔组织生长因子(mouse CTGF)

小鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 (mouse CTLA-4)

小鼠细胞色素P450(mouse Cytochrome P450)

小鼠C反应蛋白(mouse CRP)

小鼠CXC趋化因子受体3(mouse CXCR3)

小鼠CXC趋化因子配体16(mouse CXCL16)

小鼠CXCL1/KC(mouse KC)

小鼠环磷酸腺苷(mouse cAMP)

小鼠环磷酸鸟苷(mouse cGMP)

小鼠睫状神经营养因子(mouse CNTF)

小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36)

小鼠sCD40配体(mouse sCD40 Ligand)

小鼠CD34(mouse CD34)

小鼠可溶性白细胞分化抗原40配体(mouse sCD40L)

小鼠补体C3a(mouse C3a)

小鼠补体C5a(mouse C5a)

小鼠血清总补体(mouse CH50)

小鼠肌酸激酶(mouse CK)

小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB)

小鼠羟甲基赖氨酸(mouse CML)

小鼠C-肽(mouse C-peptide)

小鼠心肌钙蛋白T(mouse cTnT)

小鼠粒细胞集落刺激因子(mouse G-CSF)

小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)

小鼠巨噬细胞集落刺激因子(mouse M-CSF)

小鼠细胞色素C(mouse Cytochrome C)

小鼠双链DNA(mouse dsDNA)

小鼠多巴胺(mouse Dopamine)