1、elisa酶联免疫试剂盒说明书温育的影响
温育是影响ELISA测定结果的关键因素。温育时间不够,弱阳性标本检测不出;温育温度不够,弱阳性标本也难以检出。
2、洗板的影响
洗板对ELISA测定来说也是关键步骤。洗板分手工洗板和机器洗板,一般认为机器洗板较手工洗板效果要好,关键是洗板次数的选择。洗板次数较少,造成残留,可引起假阳性结果;洗板次数过多,可造成抗原抗体结合物洗脱,造成假阴性结果。
3、 elisa酶联免疫试剂盒说明书显色的影响
影响显色的关键是显色温度和显色时间,有些实验室操作人员不严格按说明书操作,因为担心“花板",往往是显色时间不到就匆忙终止显色,结果造成弱阳性标本不能显色而导致假阴性发生。
4、加样的影响
加入样品、试剂及混匀时间的差异称为操作时差。操作时差在每个试验中都存在,尤为手工操作更著,对结果都会产生或大或小的影响。ELISA常用项目,例如:乙肝两对半,多是成批检测。从加*个样本到zui后一个样本,包括中间换吸管尖的工作,在这一过程中有一个时间差;加试剂及混匀也同样存在时间差,这种操作时间差会致使抗原抗体反应和酶促反应时间的不一致,而这种不一致可以直接导致误差的产生,尤其是在夏天,若不合理安排时间、尽量减少时差,将会导致假阳性或假阴性的结果出现。
ELISA检测法影响因素众多,上述只是一些常见因素分析。要想提高ELISA检测的检测质量,关键还要加强实验室科学管理,强化标准化流程操作,加强质量控制,提高人员素质,以减少检测假阳性、假阴性结果的发生。elisa酶联免疫试剂盒说明书